Хибридомна среда за сливане и селекция (HAT) 杂交瘤细胞融合筛选培养基（HAT）

产品信息 Описание на продукта

产品名称

Име на продукта

杂交瘤细胞融合筛选培养基(HAT)

Хибридомна среда за сливане и селекция (HAT)

货号 Cat.No

BRS-MED01

规格

Спецификация

500 ml/瓶

500 мл / бутилка

产品组分

Компоненти

DMEM 基础培养基:80% (体积比)

DMEM базова среда: 80% (v/v)

进口胎牛血清:10%(体积比)

Внесен фетален говежди серум (FBS): 10% (v/v)

条件培养基:10%(体积比)

Кондиционирана среда: 10% (v/v)

Консумация: 100 单位/mL

Пеницилин: 100 U/mL

Консумация: 100 单位/mL

Стрептомицин: 100 U/mL

Съдържание (хипоксантин): 100uM

Хипоксантин: 100 µM

胸腺嘧啶核苷 (тимидин): 16uM

Тимидин: 16 цМ

氨基蝶呤 (аминоптерин): 0,4 uM

Аминоптерин: 0.4 цМ

其它添加物:多种细胞因子(足量)及添加剂

Други добавки: Различни цитокини (достатъчно количество) и добавки

保存条件

Условия на съхранение

-20 градуса 保存, 有效期 18 个月.

Да се ​​съхранява при -20 градуса. Срок на годност: 18 месеца.

使用方法

Инструкции за употреба

培养基融化:

37 градуса 水浴融化本培养基,乙醇消毒外表面后置超净台备用;

注:本品融化后出现少量白色絮状物属正常现象,静置 3-5 минути使其沉至瓶底,然后吸取上清使用即可.

Размразяване на средата:

Размразете средата във водна баня при 37 градуса. Избършете външната повърхност със 70% етанол и я поставете в шкаф за биобезопасност за употреба.
Забележка: Появата на малко количество бял флокулентен материал след размразяване е нормална. Оставете средата да престои 3–5 минути, за да се утаят флокулите на дъното, след което внимателно съберете супернатантата за употреба.

细胞融合与接种:

使用物理(电融合)或化学(常规PEG)的方法完成细胞融合,然后使用本培养基直接重悬融合细胞,以合适的密度(电融合推荐:1E4细胞/孔-2E4 细胞/孔;PEG 融合推荐:5E4 细胞/孔-1E5 细胞/孔)和体积 (推荐:200ul/孔)铺 96 孔板,置37 градуса 5% CO2 培养箱静置培养.

Клетъчно сливане и посяване:

Извършете клетъчно сливане, като използвате физични (електрофузия) или химични (конвенционален PEG) методи. Ресуспендирайте слетите клетки директно в тази среда при подходяща плътност и обем:

Електрофузия: 1 × 10⁴ – 2 × 10⁴ клетки/ямка

PEG сливане: 5 × 10⁴ – 1 × 105 клетки/ямка
Препоръчителен обем: 200 µL/ямка в 96-ямкова плака.
Инкубирайте при 37 градуса, 5% CO₂ за култура.

培养液更换

融合后的第 4-8 日,根据细胞生长状态进行半换液或全换液培养;

Средна замяна:

На 4–8 дни след -сливането извършете частична или пълна подмяна на средата според статуса на растеж на клетките.

克隆筛选:

当孔中细胞克隆长至合适大小后进行融合孔阳筛检测;

Скрининг на клонинг:

Когато клетъчните клонинги в ямките достигнат подходящ размер, извършете скрининг на положителен клонинг.

注意事项

Предпазни мерки

本产品有一定毒性,仅用于杂交瘤细胞的筛选及培养,不可用于 培养活体动物,诊断或治疗药物用.

Този продукт е токсичен и е предназначен само за селекция и култура на хибридомни клетки. Не трябва да се използва за култивиране на живи животни, за диагностични цели или терапевтични приложения.

本产品适用于 HGPRT 筛选系统的杂交瘤细胞的筛选培养,不适用于 TK或其它选择系统的细胞培养.本品不能用于直接培养 HGPRT 缺陷细胞 (如 NS1, SP2/0 等).

Този продукт е подходящ за селекция и култивиране на хибридомни клетки с помощта на системата за селекция HGPRT. Не е приложимо за TK или други системи за избор. Тази среда не може да се използва за директна култура на клетки с дефицит на HGPRT- (напр. NS1, SP2/0).

本产品为无菌溶液,pH 为 7,2~7,4,取用需在无菌条件下进行.

Този продукт е стерилен разтвор с pH 7,2–7,4. Всички манипулации трябва да се извършват при асептични условия.