Здравейте! Като доставчик на каталожни пептиди често ме питат как тези пептиди са формулирани за различни приложения. Това е супер интересна тема и аз се вълнувам да споделя някои прозрения с вас.
Първо, нека поговорим какво представляват каталожните пептиди. С прости думи, те са предварително направени пептиди, които се предлагат в каталога на доставчика. Тези пептиди се използват в широк спектър от приложения, от изследвания в биохимията и фармакологията до потенциални терапевтични употреби.
Основи на формулировката
Формулирането на каталожните пептиди започва с ясно разбиране на крайната употреба. Различните приложения изискват пептидите да бъдат в специфични форми. Например, ако един пептид ще бъде използван в in vitro експеримент с клетъчна култура, той трябва да бъде във форма, която е лесно разтворима в средата за клетъчна култура. От друга страна, ако става въпрос за in vivo проучвания при животни, фактори като стабилност във физиологичната среда на тялото и бионаличност стават решаващи.
Първата стъпка при формулирането на пептид е синтезирането му. Съществуват различни методи за пептиден синтез, но най-разпространеният е твърдофазният пептиден синтез (SPPS). В SPPS пептидната верига е изградена една по една аминокиселина върху твърда опора. Този метод позволява прецизен контрол върху последователността на аминокиселините в пептида.
След като пептидът е синтезиран, той трябва да бъде пречистен. Високоефективната течна хроматография (HPLC) е широко използвана техника за пречистване на пептиди. Той разделя пептида от други примеси въз основа на техните различни взаимодействия със стационарна фаза и подвижна фаза. След пречистване, чистотата на пептида се проверява с помощта на техники като масспектрометрия.
Формулировка за изследователски приложения
В изследванията каталожните пептиди се използват в различни анализи. Например, в изследванията на свързване на рецептор - лиганд, пептидите често се използват като лиганди за изследване на афинитета на свързване и специфичността на рецепторите. За да се формулират пептиди за тези изследвания, те обикновено се разтварят в буферен разтвор, който имитира физиологичната среда. Това помага да се гарантира, че пептидът запазва естествената си конформация и може да взаимодейства правилно с рецептора.
Да вземемЕнтеростатин (говежди, кучешки, свински)като пример. Ентеростатинът е пептид, който е изследван за ролята му в регулирането на приема на храна. Когато се формулира ентеростатин за изследване на регулирането на приема на храна, той обикновено се разтваря в буфер на основата на физиологичен разтвор. Този буфер осигурява стабилна среда за пептида и е съвместим с in vitro и in vivo експерименти.
Друго често срещано изследователско приложение е изучаването на взаимодействията протеин - протеин. Пептидите могат да бъдат проектирани да имитират специфични региони на протеини и да се използват за прекъсване или засилване на тези взаимодействия. За такива изследвания пептидите трябва да бъдат формулирани по начин, по който да могат да проникнат в клетките, ако взаимодействието се случва вътре в клетката. В някои случаи пептидите се конюгират с клетъчно проникващи пептиди (CPPs), за да им помогнат да преминат през клетъчната мембрана.
Формулировка за терапевтични приложения
Когато става въпрос за терапевтични приложения, формулирането на каталожните пептиди е още по-сложно. Терапевтичните пептиди трябва да бъдат стабилни в тялото, да имат достатъчно дълъг полуживот и да могат да достигат до целевите си места.
Едно от предизвикателствата при формулирането на терапевтични пептиди е тяхната чувствителност към разграждане от ензими в тялото. За да се преодолее това, се използват различни стратегии. Например, пептидите могат да бъдат модифицирани чрез добавяне на химически групи, които ги предпазват от ензимно разграждане. Друг подход е да се капсулират пептидите в наночастици или липозоми. Тези носители могат да предпазят пептида от разграждане и също така да подобрят неговата бионаличност.
Бета - амилоид (1 - 42), човешкие пептид, който се свързва с болестта на Алцхаймер. В контекста на разработването на потенциални терапии за болестта на Алцхаймер, формулирането на бета-амилоид (1 - 42) по начин, който може да се използва за изследване на механизма на заболяването или като цел за разработване на лекарства, е от решаващо значение. Може да бъде формулиран във формулировка с бавно освобождаване, като депо на основата на полимер, за да се осигури непрекъснато снабдяване с пептида за дълъг период от време.
Формулировка за диагностични приложения
В диагностичните приложения пептидите се използват като биомаркери или като сонди за откриване на специфични молекули. Например, пептидите могат да бъдат проектирани да се свързват със специфични антитела или антигени. Когато формулирате пептиди за диагностика, те трябва да бъдат във форма, която е съвместима с диагностичния анализ.
За имуноанализи пептидите често се конюгират с етикети като флуоресцентни багрила или ензими. Тези етикети позволяват лесно откриване на взаимодействието пептид - мишена. Конюгатът пептид - етикет след това се формулира в буфер, който е подходящ за имуноанализа, обикновено буфер, който минимизира неспецифичното свързване.
Протеин киназа С (19 - 36)може да се използва като диагностичен маркер за определени заболявания, свързани с анормална активност на протеин киназа С. Когато се формулира този пептид за диагностична употреба, той може да бъде конюгиран с флуоресцентен етикет и формулиран в буфер, който е оптимизиран за използвания специфичен имуноанализ.
Контрол на качеството в пептидната формула
Контролът на качеството е съществена част от пептидната формула. За всяка партида каталожни пептиди са въведени строги мерки за контрол на качеството. Това включва проверка на чистотата, идентичността и стабилността на пептидите.
Чистотата обикновено се определя чрез HPLC и масспектрометрия. Идентичността на пептида се потвърждава чрез сравняване на неговата маса и последователност с очакваните стойности. Тестването за стабилност също е важно, особено за пептиди, които ще се съхраняват дълго време или ще се използват в дългосрочни експерименти. Пептидите се тестват при различни условия на съхранение (напр. различни температури и рН стойности), за да се гарантира, че остават стабилни.
Персонализирана формула
В нашата компания ние предлагаме и услуги за формулиране по поръчка. Ако имате предвид конкретно приложение и се нуждаете от пептид, който да бъде формулиран по определен начин, ние можем да работим с вас, за да разработим персонализирана формула. Това може да включва коригиране на състава на буфера, добавяне на специфични добавки или използване на определена система за доставяне.
Независимо дали сте изследовател, който търси пептид за следващия си експеримент, фармацевтична компания, разработваща нова терапия, или диагностична компания, нуждаеща се от пептиден биомаркер, ние имаме опит да формулираме правилния пептид за вашето приложение.
Ако проявявате интерес да научите повече за нашия каталог с пептиди или услугите ни за персонализирана формула, не се колебайте да се свържете с нас. Винаги се радваме да си поговорим и да обсъдим как можем да отговорим на вашите нужди от пептиди.
Референции
- Албъртс, Б., Джонсън, А., Луис, Дж., Раф, М., Робъртс, К. и Уолтър, П. (2002). Молекулярна биология на клетката. Гарландска наука.
- Гудман, М. и Феликс, AM (2003). Синтез на пептиди и пептидомиметици. Методи в ензимологията, 369, 1 - 21.
- Langer, R., & Tirrell, DA (2004). Проектиране на материали по биология и медицина. Природа, 428 (6982), 487 - 492.