Пептидните субстрати играят решаваща роля в различни биохимични и биологични изследователски области, включително анализи на ензимна активност, откриване на лекарства и протеомика. Модификациите на пептидните субстрати често се извършват, за да се подобри тяхната стабилност, специфичност и функционалност. Като доставчик на пептидни субстрати, аз съм добре - запознат с общите модификации на пептидни субстрати, които ще разясня в този блог.
1. Химически модификации на N - терминал
N - терминът на пептид е едно от най -често срещаните места за модификация. Една от най -простите и най -често срещани модификации е ацетилирането. Ацетилирането включва добавянето на ацетилова група към N -терминалната амино група. Тази модификация има няколко предимства. Първо, той може да предпази пептида от разграждане чрез аминопептидази, които са ензими, които разцепят пептиди от N - терминала. Например, в експериментите с in vitro клетъчна култура, ацетилираните пептидни субстрати са по -стабилни и могат да поддържат целостта си за по -дълъг период, като гарантират по -надеждни експериментални резултати.
Друга важна N - терминална модификация е добавянето на флуоресцентна или хромогенна група. Флуоресцентни етикети като флуоресцеин изотиоцианат (FITC) или родамин могат да бъдат прикрепени към N - терминала. Тези белязани пептиди се използват широко във флуоресценция - ензимна активност на базата на ензимна активност. Когато ензимът действа върху пептидния субстрат, флуоресцентният сигнал се променя, което позволява реално наблюдение на ензимната реакция. Например, при анализи на протеазна активност, FITC -белязан пептиден субстрат може да се използва за измерване на активността на протеазата чрез откриване на промяната на интензитета на флуоресценция във времето.
2. Химически модификации на c - терминал
Подобно на N - терминала, С - терминусът на пептид също е цел за модификация. Амидацията е често срещана модификация на С - терминал. Сменяйки С - терминалната карбоксилна група с амидна група, пептидът става по -устойчив на карбоксипептидази, който разцепва пептиди от С - терминала. Назначените пептиди често са по -стабилни в биологичните системи и могат да имат подобрени фармакокинетични свойства.
В допълнение, c -terminus може да бъде променен с различни функционални групи за специфични приложения. Например, закрепването на биотин група в С - терминала позволява лесно пречистване и откриване на пептида. Биотинилираните пептиди могат да бъдат улавени с помощта на зърна с стрептавидин - покрити, което е често срещана техника в изследванията на протеиново -пептидното взаимодействие. Това дава възможност на изследователите да изолират и анализират взаимодействащите протеини с висока специфичност.
3. СТРАНА - ВЪЗДУШНИ МОДИФИКАЦИИ
Страничните вериги на аминокиселини в пептиден субстрат също могат да бъдат модифицирани. Една от най -добре познатите странични модификации на веригата е фосфорилирането. Фосфорилирането възниква върху хидроксилните групи от серин, треонин или тирозинови остатъци. Фосфорилираните пептиди са от съществено значение за изследване на протеинови кинази и фосфатази. Протеиновите кинази добавят фосфатни групи към специфични аминокиселинни остатъци в протеини, докато фосфатазите ги отстраняват. Използвайки фосфорилирани пептидни субстрати, изследователите могат да измерват активността на тези ензими и да изучават сигналните пътища, участващи във фосфорилиране, зависими от процесите.
Друг вид модификация на страничната верига е въвеждането на неестествени аминокиселини. Неестествените аминокиселини могат да имат уникални химични и физични свойства, които не се намират в естествените аминокиселини. Например, някои неестествени аминокиселини могат да се използват за въвеждане на специфична химическа реактивност или за имитиране на пост -транслационни модификации. Включването на неестествени аминокиселини в пептидни субстрати може да разшири обхвата на приложенията и да подобри работата на пептидите в различни анализи.
4. Крос - свързване на модификации
Кръстосани модификации се използват за свързване на две или повече пептидни молекули заедно или за свързване на пептид с други молекули като протеини или нуклеинови киселини. Хомобифункционалните кръстосани линкери обикновено се използват за свързване на две идентични функционални групи на различни пептиди или молекули. Например, дедукцинимидил суберарат (DSS) е хомобифункционален кръстосан линкер, който може да реагира с първични амини върху пептиди. Това кръстосано свързване може да се използва за изследване на взаимодействията между протеин - пептиди или за създаване на пептидни полимери.
Хетеробифункционалните кръстосани линкери, от друга страна, имат две различни реактивни групи, което позволява специфичната връзка на различните видове молекули. Например, кръстосано линкер с амино -реактивна група и сулфхидрил - реактивна група може да се използва за свързване на пептид с протеин, който има свободна сярна група. Кръстосани модификации могат да се използват и за създаване на пептидни конюгати, които имат потенциални приложения в доставката на лекарства и целевата терапия.
5. Примери за модифицирани пептидни субстрати
Ние предлагаме широка гама от модифицирани пептидни субстрати. Например,Mu-val-HPH-FMKе пептиден субстрат със специфични модификации. Той е предназначен за използване в анализи на активността на каспаза. Модификациите в този пептиден субстрат повишават неговата специфичност към каспази, което позволява точно измерване на активността на каспаза.
Z-val-phe-choе друг важен пептиден субстрат. Това е пептиден субстрат на инхибитора на калпаин. Модификациите в този пептид го правят мощен инхибитор на калпаина, важна протеаза, участваща в много физиологични и патологични процеси. Използвайки този пептиден субстрат, изследователите могат да изучават ролята на калпаина в различни биологични системи и да развият потенциални лекарства, насочени към калпаини.
Калпаин инхибитор XIсъщо е ценен продукт в нашия каталог. Той има специфични модификации, които го правят високоефективен инхибитор на калпаина. Този пептиден субстрат може да се използва в in vitro и in vivo проучвания за изследване на функцията на калпаина и за разработване на терапевтични стратегии за свързани с калпаин заболявания.
6. Значение на модифицираните пептидни субстрати в научните изследвания и промишлеността
Модифицираните пептидни субстрати са от голямо значение както в научните изследвания, така и в индустрията. В областта на изследванията те са основни инструменти за изучаване на ензимната функция, протеино -протеиновите взаимодействия и сигналните пътища. Например, при изследване на рака модифицираните пептидни субстрати могат да бъдат използвани за изследване на активността на протеази, които участват в туморна инвазия и метастази. Разбирайки ролята на тези протеази, изследователите могат да развият нови лекарства за борба с рака.
Във фармацевтичната индустрия модифицираните пептидни субстрати се използват при откриване и развитие на лекарствата. Те могат да бъдат използвани като водещи съединения за разработване на нови лекарства или като сонди за скрининг на потенциални кандидати за лекарства. Например, модифициран пептиден субстрат, който може конкретно да инхибира ензима, свързан с заболяването, може да бъде допълнително оптимизиран, за да се развие по -мощно и селективно лекарство.
7. Заключение и призив за действие
В заключение, често срещаните модификации на пептидни субстрати включват N - терминал, С - терминал, странична верига и кръстосани модификации. Тези модификации повишават стабилността, специфичността и функционалността на пептидните субстрати, като ги правят незаменими инструменти в различни изследвания и индустриални приложения. Като доставчик на пептидни субстрати, ние се ангажираме да предоставяме висококачествени модифицирани пептидни субстрати, за да отговорим на разнообразните нужди на нашите клиенти.
Ако се интересувате от нашите пептидни субстрати или имате въпроси относно модификациите на пептидите, моля не се колебайте да се свържете с нас за допълнителна дискусия и поръчки. Ние сме повече от щастливи да ви помогнем да намерите най -подходящите пептидни субстрати за вашите изследвания или индустриални проекти.
ЛИТЕРАТУРА
- Creighton, TE (1993). Протеини: Структури и молекулни принципи. Wh Freeman and Company.
- Nelson, DL, & Cox, MM (2008). Принципи на биохимията на Lehninger. Wh Freeman and Company.
- Walker, JM (2002). Наръчник за протеинови протоколи. Humana Press.