Общите проблеми и решения в процеса на пептиден синтез включват следните аспекти:
Съдържание на пептиди: Съдържанието на пептиди се отнася до процента на пептидни вещества в проба спрямо непептидни вещества. В пептидните продукти, в допълнение към самия пептид, са включени и несолеви компоненти, въведени по време на производствения процес, като вода, абсорбирани разтворители, координационни йони и соли
Химична стабилност:
Реакция на дезаминиране: Asn/Gln остатъците лесно се хидролизират до образуване на Asp/Glu.
Хидролиза: Пептидните връзки в пептидите лесно се разрушават чрез хидролиза, особено тези, образувани от участието на Asp, особено Asp Pro и Asp Gly пептидните връзки.
Реакция на рацемизация: Всички аминокиселинни остатъци с изключение на Gly имат хирални алфа въглеродни атоми и са склонни към реакция на рацемизация при алкална катализа. Asp остатъците са най-склонни към реакции на рацемизация.
- елиминиране на разграждането: Cys, Ser, Thr, Phe, Tyr и други остатъци могат да бъдат разградени чрез - елиминиране, което е по-вероятно да се случи при алкално pH и се влияе от температурата и металните йони
Физическа стабилност:
Денатурация, адсорбция, агрегация или утаяване: Пептидната денатурация обикновено е свързана с разрушаването на третичните и вторичните структури. В денатурирано състояние пептидите са по-податливи на химични реакции и тяхната активност трудно се възстановява. Междинният продукт, образуван по време на процеса на денатурация, има ниска разтворимост и е склонен към агрегация и утаяване
запазване:
Най-добри условия за съхранение: Пептидите обикновено се съхраняват под формата на лиофилизиран прах, който е много стабилен при -20 градуса, особено след сушене чрез замразяване и се съхранява в сушилня на -20 градуса. Повечето пептиди могат да се съхраняват при тази температура в продължение на няколко години без промяна. За да се намали въздействието на влажността, лиофилизираните пептиди трябва да се възстановят до стайна температура при сухи условия, преди да бъдат изложени на въздух.
Опаковка: Hesheng Biotechnology препоръчва малки опаковки, за да се избегнат повтарящи се цикли на замразяване-размразяване, да се намали броят на отварянията и затварянията на контейнерите, като по този начин се намалят шансовете за неправилно боравене или бактериално замърсяване и се гарантира стабилността на пептидите
Тестване за чистота:
Гаранция за чистота: Всички доставени пептиди са достигнали необходимата чистота и пептидите, които не отговарят на стандарта, ще бъдат изхвърлени. Резултатите от HPLC и MS откриване могат да проверят чистотата и молекулното тегло на пептида, като същевременно показват основните примеси.
Други методи за откриване, като аминокиселинен анализ или елементен анализ, могат да потвърдят аминокиселинния състав на пептидите като допълнително средство за потвърждаване на пептиди
Технология на синтеза:
Синтез на пептиди в твърда фаза: Синтезът на пептиди в твърда фаза не изисква пречистване на междинни продукти, което позволява непрекъснати процеси на синтез и полагане на основата за автоматизиране на синтеза на пептиди. На базата на химичен синтез на Fmoc, целевият пептид се синтезира чрез ковалентно свързване на карбоксилната група на С-терминалната аминокиселина с неразтворима полимерна смола и след това започвайки от аминогрупата на аминокиселината
Горното съдържание обобщава често срещани проблеми и контрамерки в пептидния синтез, като обхваща множество аспекти като химическа стабилност, физическа стабилност, условия на съхранение, тестване за чистота и др.