Среда за експанзия и субклониране на хибридомни клетки 杂交瘤细胞扩培及亚克隆专用培养基

产品信息 Описание на продукта

产品名称

Име на продукта

杂交瘤细胞扩培及亚克隆专用培养基

Среда за експанзия и субклониране на хибридомни клетки

货号 Cat.No

BRS-MED02

规格

Спецификация

500 ml/瓶

500 мл/бутилка

产品组分

Компоненти

DMEM基础培养基:80%(体积比)

DMEM базова среда: 80% (v/v)

进口胎牛血清:10%(体积比)

Фетален говежди серум (FBS, внесен): 10% (v/v)

条件培养基:10%(体积比)

Кондиционирана среда: 10% (v/v)

Консумация: 100 单位/mL

Пеницилин: 100 U/mL

Консумация: 100 单位/mL

Стрептомицин: 100 U/mL

其它添加物:单细胞增殖因子及小分子添加剂

Други добавки: Фактори на едно-клетъчна пролиферация и добавки с малки молекули

保存条件

Условия на съхранение

-20 градуса 保存, 有效期 18 个月.

Да се ​​съхранява при -20 градуса, срок на годност 18 месеца

使用方法

Инструкции за употреба

培养基融化:

37 градуса 水浴融化本培养基,乙醇消毒外表面后置超净台备用;

注:本品融化后出现少量白色絮状物属正常现象,静置3-5min使其

沉至瓶底,然后吸取上清使用即可.

Размразяване на средата:

Размразете средата във водна баня при 37 градуса. Избършете външната повърхност със 70% етанол и поставете в шкаф за биобезопасност за употреба.
Забележка: Появата на малко количество бял флокулентен материал след размразяване е нормална. Оставете средата да престои 3–5 минути, за да се утаят флокулите, след което вземете супернатантата за употреба.

融合孔处理(状态良好细胞):

针对状态良好的融合孔(比如孔内培养基颜色正常或轻微发黄,且显微镜下细胞状态良好,透亮,大小正常等)可直接使用黄枪头轻轻吹打融合孔,细胞计数后按0.8-1.5cell/孔/200ul培养基铺板.

Работа с Fusion Wells – здрави клетки:

За слети ямки с клетки в добро състояние (напр. нормален среден цвят или леко жълтеникав, клетките под микроскоп изглеждат здрави, ярки и нормални по размер), пипетирайте внимателно нагоре и надолу с жълтия връх на пипетата. Пребройте клетките и платете при 0,8–1,5 клетки/ямка в 200 µL среда.

融合孔处理(状态欠佳细胞):

针对状态不太良好的融合孔(比如孔内培养基颜色酸化发黄或显微镜下细胞状态皱缩,发黑等)可选择2种方式进行后续亚克隆.

Боравене с термоядрен синтез – неоптимални клетки:

За ямки за сливане с клетки в неоптимално състояние (напр. среда подкиселена/жълта или клетките изглеждат спаружени, тъмни под микроскоп) са налични две опции за последващо субклониране:

第一种方式是将融合孔细胞吸至装有1ml本培养基的24孔板内,在扩培后的第2-3日再行计数进行亚克隆铺板(0. 8-1,5 клетки/孔/200ul培养基),此时融合孔细胞倍增的次数有限且细胞状态良好,非常适于亚克隆铺板;

Вариант 1: Прехвърлете клетки от гнездото за сливане в плака с 24 гнезда, съдържаща 1 mL от тази среда. След 2-3 дни разрастване, пребройте клетките и извършете субклониране при 0,8-1,5 клетки/ямка в 200 µL среда. На този етап удвояването на клетките е ограничено, но състоянието на клетките е добро, което ги прави идеални за субклониране.

第2种方式是使用黄枪头小心吸弃融合孔上清,每孔补充200ul新鲜的本培养基,至37度5% CO2静置培养3-4小时,然后取样细胞计数后进行亚克隆(0,8-1,5клетки/孔/200ul培养基);

Внимателно отстранете супернатантата от ямката за синтез с помощта на жълт накрайник на пипетата и добавете 200 µL свежа среда на ямка. Инкубирайте при 37 градуса, 5% CO₂ за 3-4 часа. След това вземете проби от клетките, пребройте и извършете субклониране при 0,8–1,5 клетки/ямка в 200 µL среда.

注:使用本司"杂交瘤扩培及亚克隆专用培养基"培养后的亚克隆一般第6-8日即可开始下游检测筛选.

Забележка: Субклоновете, култивирани с хибридомна клетъчна експанзия и среда за субклониране, обикновено достигат етап, подходящ за скрининг или анализ надолу по веригата на дни 6–8 след-субклониране.